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血液一般检验技术、血红蛋白测定.ppt

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血液一般检验技术、血红蛋白测定.ppt
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实验一,血液的一般检验技术主讲:王翠霞,【目的】,1、掌握皮肤采血法,了解不同部位采血对结果的影响。 2、掌握微量吸管的使用方法 3、掌握改良牛鲍氏计数板的使用 4、血涂片的制备,血液的一般检验技术内容,1、皮肤采血法 2、微量吸管的使用 3、牛鲍氏计数板的使用 4、血涂片的制备,毛细血管采血法,采血部位:手指或耳垂 采血器材:三棱针或专用“采血针” 注意事项:一人一针制、忌挤压等,采血前用75%酒精棉球消毒人的指腹,采血,弃去第一滴血,,改良牛鲍计数盘的使用原理,一定倍数稀释的血液或体液,混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的血细胞计数盘中,在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数,再乘以稀释倍数,即可换算成单位体积内的细胞数。,1. 采血部位的皮肤应完整,严格无菌操 作,防止采血部位感染 2. 拭去第1滴血;吸血量准确 3. 保证计数板和盖玻片清洁并符合标准 4. 一次完成充池,静置计数板2~3min 5. 压线细胞按照数上不数下,数左不数右的原则 6. HiCN转化液中氰化钾是剧毒品,配制转化液时要按剧毒品管理程序操作,注意事项,改良Neubauer计数盘结构,,上页,下页,改良Neubauer计数盘结构,,,,,,,,,改良Neubauer计数盘结构,,,正面观:,计数室,侧面观:,,,,,上页,下页,改良Neubauer计数盘结构,,录象,返回,推片:挤出一滴血置于载玻片的右侧1/4处,再取另一张边缘光滑的双凹片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状。,两玻片的角度以30~45°为宜,轻轻将双凹 片向前匀速推进,即涂成血液薄膜。,【器材】,①一次性消毒采血针②一次性微量吸管、胶吸头③75%乙醇、脱脂棉球等,1、准备材料。 2、选择采血部位。 3、按摩、消毒、针刺皮肤。 4、取第一滴血制血涂片。 5、用毛细血管采血、止血 6、稀释血液,【操作】,二、血红蛋白测定,【目的】掌握氰化高铁血红蛋白测定方法的原理及操作,【原理】,血液(SHb除外),转化液,+,Fe2+ Fe3+,HiCN稳定的棕红色,换算成每升血液中的血红蛋白浓度,,,,CN-,,,高铁氰化钾,Hi,,+,,吸收波峰在540nm,测定该处吸光度,,【器材】,①采血用具②试管、试管架③分光光度计等,【试剂】,HiCN转化液 常用文齐液,,【操作】,5ml转化液,,,,,加血20μL,,静置5min,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,540nm比色,,,计算,,计算,Hb(g/L)=A×64458×251= A ×367.7,44000,1、器材要干净、干燥 2、采血深度要适当 3、HiCN转化液中含有毒物,注意防止污染,【注意事项】,男性:131~172g/L女性:113~ 151g/L新生儿:180~ 190g/L,【参考值】,
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