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甲状腺素(T4)放射免疫测定.doc

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甲状腺素(T4)放射免疫测定.doc
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甲状腺素( T4)放射免疫测定【目的】1、初步了解放射免疫测定的一般过程;2、进一步了解 γ-闪烁测定的一般方法。【材料准备】1、试剂125I 碘-T 4 放射免疫测定药盒① 125I-T4②抗 T4 血清③T 4 标准品:6 瓶(0、20、40、80、160、320 ng/ml)④分离剂(PR 试剂)2、用具①试管(13×78 mm) 18 只②微量加样 0~200μl(可调) 、500 μl 各 1 支③塑料吸头 若干④水浴箱、离心机 各 1 台⑤γ 放免测量仪 1 套【操作程序】充分单混匀,室温放置 15 分钟,任取三管测量总放射性计数(T) ,取其平均值。然后在 3500 转/分离心 20 分钟,立即小心吸去上清液,测定各管学淀放射性计数(B) 。【结果计算】以 B/T×100%或 B/B。×%为纵座标,以 T4 标准浓度为横座标在座标用四参数拟合绘制标准曲线(计算机拟合) 。管别试剂NSR S0 S1~S 5 待测样品管S0 标准 50 50 — —S1~S5 标准 — — 50 —待测血清 — — — 50125I-T4 100 100 100 100蒸馏水 100 — — —抗 T4 血清 — 100 100 100摇匀 37℃温育 60 分钟PR 试剂 1000 1000 1000 1000室温放置 15 分钟,离心 15 分钟,3500 rpm,弃上清,测量以待测样品的 B/T×100%或 B/B。×100%的值在标准曲线上查出 样品的T4 含量。 CNSB 为非特异管计数;NSB:非特异性结合;NSB= )()(cpmcNSB本 底本 底B/B0= )()(0CNSB标 准 或 样 品B0= )()(cpmcTS本 底正常参考值:42~150 ng/ml。试剂盒系北京北方生物技术研究所生产
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