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实验6_小篮子法测定种子呼吸速率.ppt

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实验6_小篮子法测定种子呼吸速率.ppt
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实验六 环境温度对种子呼吸速率的影响(p165-166),小篮子法测定种子呼吸速率,呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。测定呼吸速率的方法很多,可以分成两大类:测定吸氧速率或者测定放出CO2速率。前者有测压法、氧电极法;后者有小篮子法、红外线CO2气体分析仪(IRGA)等方法。 测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对O2的吸收,样品用量少,且精确度高。利用红外线CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、准确,是科研上常采用的方法。,呼吸速率的测定方法,1. 实验目的,1)学习呼吸强度的碱吸收测定方法; 2)比较不同类型植物材料的呼吸强度; 3)了解环境因素(如温度)对呼吸强度的影响。,2. 实验原理(小篮子法),植物进行呼吸时放出CO2,计算一定的植物样品在单位时间内放出CO2的数量,即为该样品呼吸速率。 呼吸放出的CO2可用氢氧化钡溶液吸收,实验结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液,从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算出呼吸过程中释放的CO2的量。,,Ba(OH)2 +CO2 →BaCO3↓+ H2O Ba(OH)2(剩余)+ H2C2O4→BaC2O4↓+ 2H2O每毫升1/44 mol/l 的草酸相当于1mg CO2,3. 材料和仪器设备,1)材料:发芽的小麦种子和煮死的小麦种子 2)仪器设备:呼吸测定装置(小篮子);电子天平;酸式及碱式滴定管。,3)试剂:,饱和Ba(OH)2溶液 1/44mol/l 草酸溶液 酚酞指示剂,4. 实验步骤,1)取500ml 广口瓶3个,标记为1、2、3号,瓶口用橡皮塞塞紧,瓶塞下面挂一铁丝小篮,以便装植物样品,整个装置即谓“广口瓶呼吸测定装置”。,Ba(OH)2 溶液,2)称取10g死种子,放入其中的一个小篮子中;再称取3份活种子,每份10g,分别放入另外3个小篮子中; 3)分别在4个广口瓶中准确加入20ml饱和Ba(OH)2溶液; 4)将3个放有活种子的小篮子分别挂在编号为1-3的广口瓶内,盖紧瓶塞,在低温(1号,冰箱冷藏室)、室温(2号)和高温(3号,40°C)中处理,经常摇动,以破坏碱液表面的硬膜;,5)将放有死种子的小篮子挂在0号广口瓶内,在室温中按以上步骤处理; 6)20min后,取出广口瓶中的小篮子,加入1-2滴酚酞指示剂,盖紧瓶盖; 7)用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失为止,记录空白及各个温度处理下的草酸用量(记为V0、V1、V2、V3);,实验处理情况列表,5. 数据记录与处理,结果计算与分析,呼吸速率v(mgCO2· g-1 fw. · h-1):上式中,V0:空白滴定用去的草酸量(ml)Vn:处理滴定用去的草酸量(ml),注意事项,防止口中呼出的气体进入广口瓶!滴定时使用有孔的盖子,通过小孔进行滴定!,思考题,本实验中哪些操作步骤对结果影响较大?,,实验七 种子活力的测定 (p215-218),
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