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实验七 植物染色体带型分析.ppt

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实验七 植物染色体带型分析.ppt
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实验七 植物染色体带型分析,教研室:遗传学与细胞生物学 指导教师:黄世全,[目的要求]: 1、了解染色体带型分析的有关概念。 2、了解染色体C-带显色技术。 3、学会植物染色体C-带分析方法。,[实验原理]: 染色体是遗传物质的载体,如果染色体发生变化了,生物的外在性状必然发生变化。染色体数目的变化比较容易察觉,但是染色体结构和组成成分的变化就比较难以发现。染色体显带技术使不可察觉的染色体结构和成分变化转变为可以定量表述的带型变化。 染色体分带技术:染色体经物理、化学因素处理后,再进行染色,使其呈现特定的深浅不同带纹(band)的方法。 染色体分带技术可分为两大类,一类是产生的染色带分布在整个染色体和长度上,如Q、G和R带;另一类是局部性的显带,它只能使少数特定的带或结构染色,如C、T和N带等。,[实验原理]: 其中C-带主要显示着丝粒附近的异染色质,故称为C-带,其他异染色质均可显示。染色体经酸(HCl)、碱[Ba(OH)2] 和缓冲盐溶液(2×SSC)处理后, 再以Giemsa染液染色而显示的带型。它包括染色体C-带结构特征、C-带位置、染色强度,异染色质含量等。 作为细胞分类学指标,染色体C-带核型可以从不同层次上反映其生物类群间的分类关系。染色体C-带在同一属内有一明显而恒定的C-带结构模式,往往构成“标志性C-带带纹”,由此可以进行属级分类单元的比较。,材料:经C-分带技术处理得到的黑麦染色体的图片。 器具:显微镜、测微尺、毫米尺、镊子、剪刀、绘图纸、圆规、铅笔等。,操作程序: 1、选取良好的有丝分裂中期的C-带图片。 2、染色体C-带位置: (1)着丝粒C-带(也称着丝粒区C-带):指着丝粒本身及其相邻部分的C-带纹。 (2)端部C-带:指染色体末端区域的C-带纹。 (3)居间C-带:在着丝粒C-带和端部C-带之间范围内的C-带纹。根据其所在位置又细分为近着丝粒带、中间带、亚中间带和亚端带等。 3、每对同源染色体上相对应的C-带是否纯合即在某一特定位置相配对的两条染色体是否都具有带纹,带纹大小、染色程度是否一致,如不一致,则按杂合计,操作程序: 4、各染色体C-带带纹的着色程度在同样的处理程序下,染色体组中各染色体C-带带纹上存在恒定的深浅不同的着色反应,它表示C-带结构异染色质在质上的差异。可以四级表示法:特强:染色极深;强:染色较深;中:染色程度中等;弱:染色极淡。 5、根据以上C-带各项统计结果,描述各染色体的C-带特征,并据此绘制出黑麦染色体C-带带型示意图。,[重要实验步骤]: 在观察染色体C-带型时,同时要考虑染色体长度、着丝粒位置等核型特征。,[实验注意事项] : 带型辨别是要考虑到因制片、分带处理而导致的带型可能出现的变化。另外染色体排队时也要从大到小,短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上。,例如,节节麦C-带,排队:模式图:,对各染色体的描述,1D:短臂具有端带及亚端带,长臂具有两条不太明显的中间带。 2D:短臂具有端带及明显的近着丝粒带,长臂具端带及两条小的中间带。 3D:短臂显示端带及亚端带。 4D:短臂具有端带及近着丝粒带,长臂具有1条明显的特征带。 5D:是节节麦中唯一一组随体染色体,短臂具有端带和1条中间带,随体经C-分带后不易观察。 6D:为等臂染色体,长臂及短臂各具有1条明显的中间带。 7D:长臂具有端带,长臂和短臂上具有近端带及不太明显的小带。,
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