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尿液蛋白、糖和酮体检测.ppt

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尿液蛋白、糖和酮体检测.ppt
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10/2/2019,尿化学检查,10/2/2019,目的要求,掌握:尿蛋白、尿糖定性试验和尿酮体Rothera改良法。 熟悉:尿蛋白形成机制与分类、尿蛋白测定的质量控制。 了解:尿酮体的产生。,10/2/2019,尿液酸碱度测定,,10/2/2019,尿液酸碱度测定,测定方法指示剂法、试带法、滴定法、pH计法 参考值晨 尿:pH 5.5~6.5,平均pH 6.0随机尿:pH 4.5~8.0可滴定酸度:20-40 mmol/24尿,10/2/2019,生理性变化:食物的影响进餐后尿pH↑——碱潮生理活动及药物的影响,临床意义,P143表5-7,10/2/2019,病理变化:尿pH↓(酸性尿):代谢性酸中毒、发热、低血钾性碱中毒、DM、痛风等尿pH↑(碱性尿):碱中毒、 呕吐、尿路感染、肾小管性酸中毒等,,10/2/2019,尿蛋白检查,10/2/2019,,正常人肾小球滤液中每日排出的蛋白质在2~4克,大部分被重吸收 终尿中蛋白质为30 ~ 130 mg / 24h,随机尿中为0 ~ 80 mg/L,尿蛋白定性试验阴性 蛋白尿(proteinuria):当尿液中蛋白质含量大于150 mg / 24h或大于100 mg / L时,尿蛋白定性试验阳性,10/2/2019,一、尿蛋白组成,低分子量蛋白:分子量小于4万,包括免疫球蛋白Fc片段、微球蛋白、游离轻链等,含量极少。 中分子量蛋白:分子量4~9万,以白蛋白为主,占尿蛋白总数的1/2~2/3。 高分子量蛋白:分子量9万以上,包括 T-H糖蛋白、粘液蛋白、分泌型 IgA 等,含量较少。,10/2/2019,二、蛋白质定性检测方法,(一)加热乙酸法 加热煮沸使蛋白质变性、凝固,加酸至尿蛋白质等电点(pH4.7),促使变性蛋白下沉 加酸可溶解因加热析出的磷酸盐或碳酸盐结晶所致的混浊。 方法学评价 特异性强,干扰因素少,但加酸过多/少均可使阳性程度减弱,敏感性较低,0.15 g/L左右 为蛋白定性确证实验,10/2/2019,干扰因素:,①尿液偏碱(pH9)或偏酸(pH3)时呈假阴性试验前pH值调至5~6. ②尿液离子强度低(无盐或低盐饮食者)时,可呈假阴性。滴加饱和NaCl溶液1~2滴后再进行试验。 ③尿中混有生殖系统分泌物时,可出现假阳性用中段尿或离心后取上清液检测。 ④加热加酸再加热后,立即判读结果。,10/2/2019,,(二)、磺基水杨酸法(sulfosalicylic acid method,SSA)在略低于蛋白质等电点下的酸性环境中,蛋白质带正电荷的氨基能与带负电荷的磺基水杨酸根结合,形成不溶性蛋白质盐而沉淀 方法学评价 操作简便,反应灵敏,结果显示快,0.05 ~ 0.1 g /L,是检测尿蛋白的参考方法和确证试验,10/2/2019,磺基水杨酸法干扰因素,①尿液pH值9或pH3时呈假阴性 故试验前应先将尿液pH值调至5~6. ②大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时可出现假阳性。 ③ 尿中混有生殖系统分泌物时,可出现假阳性,故用中段尿或离心后取上清液检测。 ④判断结果应于1分钟内。,10/2/2019,(三)试带法(reagent strip method),原理:利用pH指示剂的蛋白误差原理操作简便,快速,适用于人群健康普查,只对白蛋白敏感,10/2/2019,试带法干扰因素,PH 药物: 假阳性:奎宁、嘧啶或尿中含磷酸盐、季胺盐等。 假阴性:青霉素、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂。,10/2/2019,一些干扰因素的影响,加热乙酸法 磺基水杨酸法 试带法 pH9 假阴性 假阴性 假阳性 pH3 假阴性 假阴性 假阴性 青霉素 假阳性 假阴性,,,,10/2/2019,三、临床意义,病理性蛋白尿 生理性蛋白尿,10/2/2019,病理性蛋白尿,肾前性蛋白尿本-周蛋白、血/肌红蛋白、溶菌酶等。常见于浆细胞病、血管内溶血(PNH)、大面积肌肉损伤、酶类增高 肾性蛋白尿肾小球性蛋白尿、肾小管性蛋白尿 肾后性蛋白尿肾脏以下泌尿生殖系统炎症、结石、结核、肿瘤、泌尿系邻近器官疾病等,10/2/2019,(一)、病理性蛋白尿,1、肾小球性蛋白尿:最常见 (1)选择性蛋白尿:当肾小球损伤较轻时, 以4-9万的相对分子质量中等的清蛋白为主。 Pro:+++-++++. Pro大于3.5g/24h. 最典型的是肾病综合症。 (2)非选择性蛋白尿:反映肾小球毛细血管壁有严重破裂损伤。以分子量较大和中等的蛋白质同时存在为主。 Pro:+-++++。定量0.5~3g/L。 多见于原发或继发肾小球疾病。,10/2/2019,2.肾小管性蛋白尿: 感染、中毒引起。
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