• / 44
  • 下载费用:10 金币  

尿液蛋白、糖和酮体检测.ppt

关 键 词:
尿液蛋白、糖和酮体检测.ppt
资源描述:
10/2/2019,尿化学检查,10/2/2019,目的要求,掌握:尿蛋白、尿糖定性试验和尿酮体Rothera改良法。 熟悉:尿蛋白形成机制与分类、尿蛋白测定的质量控制。 了解:尿酮体的产生。,10/2/2019,尿液酸碱度测定,,10/2/2019,尿液酸碱度测定,测定方法指示剂法、试带法、滴定法、pH计法 参考值晨 尿:pH 5.5~6.5,平均pH 6.0随机尿:pH 4.5~8.0可滴定酸度:20-40 mmol/24尿,10/2/2019,生理性变化:食物的影响进餐后尿pH↑——碱潮生理活动及药物的影响,临床意义,P143表5-7,10/2/2019,病理变化:尿pH↓(酸性尿):代谢性酸中毒、发热、低血钾性碱中毒、DM、痛风等尿pH↑(碱性尿):碱中毒、 呕吐、尿路感染、肾小管性酸中毒等,,10/2/2019,尿蛋白检查,10/2/2019,,正常人肾小球滤液中每日排出的蛋白质在2~4克,大部分被重吸收 终尿中蛋白质为30 ~ 130 mg / 24h,随机尿中为0 ~ 80 mg/L,尿蛋白定性试验阴性 蛋白尿(proteinuria):当尿液中蛋白质含量大于150 mg / 24h或大于100 mg / L时,尿蛋白定性试验阳性,10/2/2019,一、尿蛋白组成,低分子量蛋白:分子量小于4万,包括免疫球蛋白Fc片段、微球蛋白、游离轻链等,含量极少。 中分子量蛋白:分子量4~9万,以白蛋白为主,占尿蛋白总数的1/2~2/3。 高分子量蛋白:分子量9万以上,包括 T-H糖蛋白、粘液蛋白、分泌型 IgA 等,含量较少。,10/2/2019,二、蛋白质定性检测方法,(一)加热乙酸法 加热煮沸使蛋白质变性、凝固,加酸至尿蛋白质等电点(pH4.7),促使变性蛋白下沉 加酸可溶解因加热析出的磷酸盐或碳酸盐结晶所致的混浊。 方法学评价 特异性强,干扰因素少,但加酸过多/少均可使阳性程度减弱,敏感性较低,0.15 g/L左右 为蛋白定性确证实验,10/2/2019,干扰因素:,①尿液偏碱(pH9)或偏酸(pH3)时呈假阴性试验前pH值调至5~6. ②尿液离子强度低(无盐或低盐饮食者)时,可呈假阴性。滴加饱和NaCl溶液1~2滴后再进行试验。 ③尿中混有生殖系统分泌物时,可出现假阳性用中段尿或离心后取上清液检测。 ④加热加酸再加热后,立即判读结果。,10/2/2019,,(二)、磺基水杨酸法(sulfosalicylic acid method,SSA)在略低于蛋白质等电点下的酸性环境中,蛋白质带正电荷的氨基能与带负电荷的磺基水杨酸根结合,形成不溶性蛋白质盐而沉淀 方法学评价 操作简便,反应灵敏,结果显示快,0.05 ~ 0.1 g /L,是检测尿蛋白的参考方法和确证试验,10/2/2019,磺基水杨酸法干扰因素,①尿液pH值9或pH3时呈假阴性 故试验前应先将尿液pH值调至5~6. ②大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时可出现假阳性。 ③ 尿中混有生殖系统分泌物时,可出现假阳性,故用中段尿或离心后取上清液检测。 ④判断结果应于1分钟内。,10/2/2019,(三)试带法(reagent strip method),原理:利用pH指示剂的蛋白误差原理操作简便,快速,适用于人群健康普查,只对白蛋白敏感,10/2/2019,试带法干扰因素,PH 药物: 假阳性:奎宁、嘧啶或尿中含磷酸盐、季胺盐等。 假阴性:青霉素、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂。,10/2/2019,一些干扰因素的影响,加热乙酸法 磺基水杨酸法 试带法 pH9 假阴性 假阴性 假阳性 pH3 假阴性 假阴性 假阴性 青霉素 假阳性 假阴性,,,,10/2/2019,三、临床意义,病理性蛋白尿 生理性蛋白尿,10/2/2019,病理性蛋白尿,肾前性蛋白尿本-周蛋白、血/肌红蛋白、溶菌酶等。常见于浆细胞病、血管内溶血(PNH)、大面积肌肉损伤、酶类增高 肾性蛋白尿肾小球性蛋白尿、肾小管性蛋白尿 肾后性蛋白尿肾脏以下泌尿生殖系统炎症、结石、结核、肿瘤、泌尿系邻近器官疾病等,10/2/2019,(一)、病理性蛋白尿,1、肾小球性蛋白尿:最常见 (1)选择性蛋白尿:当肾小球损伤较轻时, 以4-9万的相对分子质量中等的清蛋白为主。 Pro:+++-++++. Pro大于3.5g/24h. 最典型的是肾病综合症。 (2)非选择性蛋白尿:反映肾小球毛细血管壁有严重破裂损伤。以分子量较大和中等的蛋白质同时存在为主。 Pro:+-++++。定量0.5~3g/L。 多见于原发或继发肾小球疾病。,10/2/2019,2.肾小管性蛋白尿: 感染、中毒引起。小分子蛋白质尿 Pro:+-++。定量1~2g/L。 常见于肾小管疾病。 3、混合性蛋白尿:肾小管和肾小球同时损伤,大中小Pro均增多。,10/2/2019,,4、溢出性蛋白尿: 血循环中,出现中、小分子为主的异常蛋白质,如:游离Hb、肌红蛋白、溶菌酶、本周蛋白等,超过了肾小管的重吸收最大能力 Pro:+—++。 常见于MM。 5、组织性蛋白尿:肾组织代谢产生、组织破坏分解的、炎症或药物刺激泌尿系统分泌的蛋白质等。 Pro:±-+ 多为T-H糖蛋白,10/2/2019,10/2/2019,(二)、生理性蛋白尿,1.功能性蛋白尿:剧烈运动、发热、寒冷刺激、精神紧张、交感神经兴奋等 多见与青少年。 2.体位性蛋白尿:特点:卧位时尿蛋白阴性,起床活动或久立后,尿蛋白阳性。 多见于发育期少年。 3.偶然性蛋白尿:又称假性蛋白尿,混入多量血液、脓液、粘液或生殖系统分泌物,10/2/2019,尿蛋白,血浆蛋白,组织蛋白,肾小球性,肾小管性,混合性,溢出性,组织性,泌尿系统、泌尿外系统,,,,,,,,,,,,,,,肾病综合征 肾病性蛋白尿,原发、继发肾小球疾病,,,,,肾小管间质病变、中毒性肾病,,浆细胞病、血管内溶血、肌肉损伤,,肾脏疾病、炎症、中毒、泌尿道结石,,泌尿道、生殖道炎症、出血、排泌物污染,,10/2/2019,尿糖检查,,10/2/2019,尿糖检查,尿中糖来源于血中葡萄糖;原尿中的糖几乎全部被肾小管重吸收;正常人尿中可有微量葡萄糖(<2.8mmol / 24h),定性检测为阴性 尿糖定性阳性,即为糖尿(glucosuria) 尿糖一般指葡萄糖,偶尔可见乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等,10/2/2019,尿糖的形成,葡萄糖代谢异常使血糖升高,超过肾糖阈 血糖正常,肾糖阈降低影响因素:血糖浓度肾血流量肾糖阈(renal threshold of sugar),,10/2/2019,肾糖阈,将尿液中开始出现葡萄糖时的血浆葡萄糖水平称为肾糖阈 反映近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力,当血糖 8.88 mmol / L时,尿中开始出现葡萄糖,且随着血糖浓度增高,尿糖含量也增高,10/2/2019,检测方法,1.糖还原试验(班氏法,Benedict) 原理:葡萄糖含醛基,在热碱溶液中将2价铜(蓝色)还原成低价的氧化亚铜(棕红色沉淀),生成氢氧化亚铜 易受其它糖或还原物质的干扰,特异性差,10/2/2019,2.葡萄糖氧化酶试纸法 原理:利用葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成H2O2,在过氧化酶的催化下,使供氢体显色 特异性强,灵敏度高,简便快速,用于尿化学分析仪,3.薄层层析法 特异敏感,操作复杂,10/2/2019,临床意义,血糖增高性糖尿(hyperglycemic glycosuria)摄入性应激性代谢性 :糖尿病 内分泌性:甲亢、垂体前叶功能亢进、嗜铬细胞瘤等,10/2/2019,血糖正常性糖尿( normoglycemic glycosuria),又称肾性糖尿(renal glycosuria): 出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低,即肾糖阈减低所致的糖尿 见于:家族性或获得性肾性糖尿、新生儿糖尿、妊娠期或哺乳期妇女等,10/2/2019,尿糖检查的临床意义,糖尿,非葡萄糖尿,葡萄糖尿,,胰岛外性糖尿,生理性糖尿,,摄食性糖尿,妊娠性糖尿,神经精神性糖尿,,病理性糖尿,真性糖尿,,半乳糖尿,果糖尿,戊糖尿,其他糖尿,,10/2/2019,尿酮体 (urine ketone bodies ,KET),,10/2/2019,,脂肪酸 乙酰辅酶A,,,乙酰乙酸,丙酮,β羟丁酸,,,酮体在肝细胞中的生成,,10/2/2019,酮体组成:乙酰乙酸 (20%)β-羟丁酸(78%)丙 酮(2%) 正常人血浆中酮体2.0 ~ 4.0 mg / L,尿中酮体极少 定性试验(-)在饥饿,各种原因引起糖代谢发生障碍,脂肪分解增加及糖尿病酸中毒时,因产生酮体速度大于组织利用速度,可出现酮血症(50mg/L),继而产生酮尿(ketonuria),10/2/2019,检测方法,试带法 亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物 是目前最常用的尿酮体筛检方法,简易快速、敏感 各种试带对丙酮和乙酰乙酸灵敏度不一,10/2/2019,湿化学法 改良Rothera 法(酮体粉法):将亚硝基铁氰化钠、硫酸铵、无水碳酸钠混合研磨成粉。在碱性条件下,丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠和硫酸铵作用,生成紫色化合物。,10/2/2019,参考值,定性:阴性定量: 丙 酮:170~420 mg/L乙酰乙酸 ≤20 mg/L,10/2/2019,注意事项,1.标本应新鲜: 丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性,乙酰乙酸易受热分解成丙酮 尿液被细菌污染后,酮体消失。 因此尿液必须新鲜。,10/2/2019,注意事项,2.根据病程分析结果: 早期,主要酮体成分β羟丁酸,很少或缺乏乙酰乙酸,此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。 在糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后,β-羟丁酸转变为乙酰乙酸,反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高,易对病情估计过重。 注意病程发展,与临床医生共同分析实验结果 。,10/2/2019,方法学评价,1.灵敏度:不同方法对各种成分灵敏度不一致。与乙酰乙酸发生强反应,与丙酮发生弱反应,与β-羟丁酸不反应。 2.干扰因素 (1)假阳性:尿中含多量肌酐、肌酸,高色素尿,尿中含酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物等。,10/2/2019,方法学评价,(2)假阴性: ①标本收集和保存不当, ②亚硝基铁氰化钠失效, ③大量维生素C ④糖尿病酮症酸中毒者肾功能严重受损而肾阈值升高时,尿酮体可减少,出现加阴性。 ⑤乙酰乙酸和丙酮不稳定,易分解或挥发导致假阴性。,10/2/2019,临床意义,糖尿病酮症酸中毒:早期诊断非糖尿病酮症中毒服用双胍类降糖药,,
展开阅读全文
  微传网所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
0条评论

还可以输入200字符

暂无评论,赶快抢占沙发吧。

关于本文
本文标题:尿液蛋白、糖和酮体检测.ppt
链接地址:https://www.weizhuannet.com/p-10054589.html
微传网是一个办公文档、学习资料下载的在线文档分享平台!

网站资源均来自网络,如有侵权,请联系客服删除!

 网站客服QQ:80879498  会员QQ群:727456886

copyright@ 2018-2028 微传网络工作室版权所有

     经营许可证编号:冀ICP备18006529号-1 ,公安局备案号:13028102000124

收起
展开