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荧光定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义.ppt

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荧光定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义.ppt
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定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义,金域医学检验中心,一、流行病学,HBV感染呈世界性流行,但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性HBV感染者,每年约有100 万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌 (HCC),二、病原学,乙型肝炎病毒 (HBV) 属嗜肝DNA 病毒科 (hepadnaviridae),基因组长约3.2kb ,为部分双链环状DNA。 HBV 含4个部分重叠的开放读码框 (ORF),即前S/S 区、前C/C 区、P 区和X 区。前S/S 区编码大 (前S1、前S2 及S)、中 (前S2 及S)、小 (S) 3 种包膜蛋白;前C/C 区编码HBeAg 及HBcAg;P 区编码聚合酶;X 区编码X 蛋白。 HBV由于基因序列的不同又可以分为A-H八种基因型.,,三 乙型肝炎的发病机制,HBV是通过刺激宿主的免疫系统攻击受感染肝细胞来间接地引起肝损伤。 受HBV感染的肝细胞在其表面表达病毒蛋白质,成为CTL攻击的目标。 针对受染细胞的免疫反应引起炎症和坏死。 坏死-炎症活动持续存在导致肝纤维化。,四 实验室检测方法,一 传统实验室检测方法 1.血清学检测(两对半检测) ①HBsAg②抗-HBs ③HBeAg ④ 抗-HBe ⑤ 抗-HBc 2.肝功能检测(ALT,AST) 二新型实验室检测方法 1.乙肝病毒定量 2.赖药性基因检测 3.乙肝病毒基因分型,五 为什么要做乙肝病毒DNA定量,1. 传统检测乙肝的方法为“乙肝两对半”和“肝功能”检测范围有限.(不能测定乙肝病毒复制情况、传染程度) 2. 乙肝病毒定量是直接检测乙肝病毒的核心成分—乙肝病毒DNA.(能够直接了解病毒的载量,了解乙肝病毒复制情况、传染程度) 例如:1. 小三阳的病情判断2. HBsAg阳性或单一的抗 —HBc阳性病情判断3. 二对半5项全部阴性病情判断4. 抗一HBs阳性病情判断,六 乙肝定量测定意义,1.定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能 2.选择治疗时机 3.估计治疗反应 5.治疗后随访和检测复发 6.确定耐药株及选择合适的治疗方案 7.抗病毒药物疗效的评价和监测 8.抗病毒新药的研制 9.研究基因的表达情况,探讨某些疾病的致病机理 10.围产期保健,七 HBV-DNA在什么水平需要治疗,(1) HBV DNA定量(乙肝病毒DNA定量) ≥105 拷贝/m l (HBeAg 阴性者为HBV DNA定量≥104 拷贝/ml); (2) ALT(谷氨酸氨基转移酶)≥ 2×ULN(ULN正常值上限);如用干扰素治疗,ALT 应≤10×ULN,血总胆红素水平应2×ULN; (3) 如ALT 2 ×ULN, 但肝组织学显示Knodell HAI ≥4,或≥G2 炎症坏死。具有(1)并有(2) 或 (3) 的患者应进行抗病毒治疗;对达不到上述治疗标准者,应监测病情变化,如持续HBV DNA定量阳性,且ALT 异常,也应考虑抗病毒治疗。,八 治疗方案,治疗的总体目标慢性乙型肝炎治疗的总体目标是:最大限度地长期抑制或消除HBV,减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化,延缓和阻止疾病进展,减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、HCC 及其并发症的发生,从而改善生活质量和延长存活时间。慢性乙型肝炎治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗,其中抗病毒治疗是关键,只要有适应证,且条件允许,就应进行规范的抗病毒治疗。,九 具体治疗,1. 抗病毒治疗 干扰素治疗 核苷(酸)类似物治疗 (拉米夫定等 ) 免疫调节治疗 其他抗病毒药物及中药治疗 2 其他对症治疗 抗炎保肝治疗 抗纤维化治疗,谢谢大家!,,谢谢大家!,
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