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血流感染的实验室诊断.ppt

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血流感染的实验室诊断.ppt
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血流感染的实验室诊断,,,,血流感染概述,,自动化血培养系统,,标本采集和运送,,阳性报警后处理方法,,如何判断是否污染,一、血流感染概述,(一)血流感染的定义,血流感染(bloodstream infections,BSI)是指各种病原微生物侵入血循环,释放毒素和代谢产物,并诱导细胞因子释放,对机体所有脏器造成损害,严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血,甚至死亡,是一种严重的全身感染性疾病。,(二)血流感染的类型,菌血症(bacteremia):细菌侵入血流,尚未大量繁殖且未引发临床症状,往往是一过性的。 败血症(septicemia):细菌进入血液大量繁殖,分泌毒素或代谢产物,产生严重的临床症状。 脓毒败血症(pyemia):细菌进入血液大量繁殖,分泌毒素或代谢产物,产生严重的临床症状,常伴有多发性脓肿或败血性休克。 毒血症(toxemia):细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。,(三)血培养的现状,送检率低,(三)血培养的现状,不正确采样 污染问题皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性检出率低 检验周期长,,二、全自动血培养系统,二、自动化血培养系统,我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细菌、分枝杆菌培养系统工作原理:细菌在培养基中代谢基质时产生CO2,并水解成H+, H+透过瓶底滤过膜,瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。,二、自动化血培养系统,仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。判读公式:加速度法速率法起始阈值法,,三、标本采集和运送,(一)标本采集,采集时间1.尽可能在抗菌药物使用前;2.对已经使用抗菌药物的病人,最好在下次用药前采集;3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率,心内膜炎(持续性菌血症)例外;4.怀疑血流感染时应尽早采血,不要强调体温超过39℃才抽血,而错过时机。,(一)标本采集,寒战后体温高峰前细菌含量最高。 血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。 血液采样的最佳时间是在寒战后和发热高峰前,此时阳性检出率最高。,(一)标本采集,采血量成人采血量为5~10ml / 瓶,分别采取需氧瓶和厌氧瓶,双部位抽血。儿童采血量为3~5ml / 瓶,采取儿童瓶。,(二)标本运送,采血后的血培养瓶应立即送检,不得超过2h。不能放入冰箱或冷冻,有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间,应置于室温。,,四、阳性报警后处理方法,血培养阳性报警后,如何处理?观察培养曲线 涂片、转种血平板 革兰染色 镜检 报告危急值若革兰染色镜检未发现细菌,怎么办?重新涂片,作瑞氏染色以培养曲线作初步判断是否假阳性,次日观察血平板上是否生长,,,,,,,,,,阳性曲线,阴性曲线,假阳性曲线,,五、如何判断是否污染?,五、如何判断是否污染?,(一)阳性检出瓶数 (二)细菌种类 (三)阳性检出时间 (四)重复培养结果,(一)阳性检出瓶数,两瓶血培养,检出一瓶,考虑污染 两瓶血培养,检出两瓶,即使是凝固酶阴性的葡萄球菌,也应考虑为致病菌,(二)细菌种类,检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时,90%以上是致病菌。 检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌,污染的可能性更低。 检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌,污染的可能性很大。,(三)阳性检出时间,阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性报警出现时间小于24h,一般为血流感染大于48h,多为污染,(四)重复培养结果,与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果相比较,2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时,考虑血流感染。,谢谢!,
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