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龙葵抗肿瘤的作用机制和治疗进展.doc

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龙葵抗肿瘤的作用机制和治疗进展08 中西七 1 班曹蓓(032008129)【摘要】龙葵,作为一种传统中药,具有显著的抗肿瘤、抗菌、抗病毒、保肝护肾、免疫调节等作用,临床应用广泛。其中,临床上发现龙葵对多种实体肿瘤具有良好的防治效果。为促进龙葵的的进一步合理开发和有效利用,故对近年来龙葵抗肿瘤的作用机制以及对多种肿瘤的治疗进展进行收集总结,以供参考。龙葵出自《药性论》,为一年生草本茄科植物龙葵的全草,别名苦菜(《唐本草》),苦葵、老鸦眼睛草、天茄子(《本草图经》),天茄苗儿(《救荒本草》),天天茄(《滇南本草》),救儿草、后红子(《滇南本草图说》),水茄、天泡草、老鸦酸浆草(《本草纲目》),天泡果(《植物名实图考》),七粒扣、乌疗草(《福建民间草药》),黑天棵(《江苏植药志》)。李时珍曰:“龙葵,言其胜滑如葵也。苦以菜味名,茄以叶行名,天泡,老鸦眼睛皆以子形名也。与酸浆相类,故加老鸦以别之。”《本草纲目》日:其性味苦微甘,滑,寒,无毒。龙葵有清热,解毒,活血,消肿等作用,可治痈疽肿毒,跌打损伤等。龙葵含龙葵碱(solanigrine)澳茄胺(oslasodine),龙葵定碱(solanigridine)、皂甙、维生素 C、树脂。作为传统中药的龙葵近年来得到了海内外学者的广泛关注,对其化学成分进行了人量深入的研究,逐步弄清其药效作用的物质基础,尤其是在抗肿瘤作用的研究方面取得一系列的研究成果。现就龙葵的主要功能作用、抗肿瘤作用机制和治疗进展等方面进行相关综述,为进一步有效利用龙葵的相应功效奠定基础。1.相关肿瘤治疗探讨1.肝癌(1)高某采用 HPLC 方法,以 2-氨基芴(2-AF)为底物,以 2-AF 被 NAT 乙酰化为 2-乙酰氨基芴(2-AAF)的量,探讨龙葵碱对 HepG2 细胞 N-乙酰基转移酶(NAT)活性的影响。实验结果表明,龙葵碱对 HepG2 完整细胞膜和细胞质内 NAT 酶都有一定的影响:龙葵碱能够降低 HepG2 完整细胞和细胞质内 2 -AAF 生成的量,并目_具有剂量相关性;随着作用时间的延长,2 -AAF 生成的量逐渐增多,但在相同作用时间下龙葵碱均能够降低 2-AAF 的生成。因此,龙葵碱是一种 NAT的抑制剂,龙葵碱对 HepG2 细胞的抑制作用与其抑制 NAT 活性有一定关系,作为 NAT 抑制剂,分为非竞争性抑制、竞争性抑制和反竞争性抑制剂。 [1](2)季某采用倒置显微镜观察形态学变化,Annexin V-FITC 联合 PI 双染法和 Tunel 法检测龙葵碱诱导人肝癌 HepG2 细胞凋亡作用.结果发现龙葵碱作用 24 h 后,贴壁细胞数量减少、体积缩小,变圆等明显凋亡形态; 在激光共聚焦显微镜下观察到 AnnexinV-FITC 阳性信号为绿色荧光,PI 为红色荧光; Tunel 阳性信号为绿色荧光.表明龙葵碱通过诱导 HepG2 细胞凋亡达到抗肿瘤的作用. [2](3)徐某和高某通过透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端检测法(TUNEL 法)检测DNA 断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测 Bcl-2与 Bax 蛋白表达,比色法检测 caspase-3 活性的变化。结果在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态。TUNEL 法发现龙葵碱高、中、低剂量组 HepG2 细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光。流式细胞术分析表明 0.4、2、10μmol/L 龙葵碱作用 HepG2 细胞 24h 凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%。同时,龙葵碱升高 caspase-3 活性,下调 Bcl-2 蛋白表达,上调 Bax 蛋白表达。结论龙葵碱通过降低 Bcl-2/Bax 的值,激活 caspase-3 酶活性诱导 HepG2 细胞凋亡。 [3] (4)季某和高某通过 MTT 法测定龙葵碱对 HepG2 细胞的细胞毒作用; AO/EB 双染,激光共聚焦扫描显微镜观察龙葵碱对 HepG2 细胞形态学的影响; TMRE 和 Fluo-3/AM 双染,激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体膜电位和细胞内[Ca2+]i 的变化。结果龙葵碱对 HepG2 细胞有细胞毒作用; 龙葵碱诱导 HepG2 细胞形态出现凋亡形态时 TMRE 和 Fluo-3/AM 双染观察表明,龙葵碱在降低线粒体膜电位的同时能够升高细胞内[Ca2+]i 浓度。结论龙葵碱降低膜电位,开放细胞膜 PT 通道,使细胞内 Ca2+顺浓度梯度转运,从而升高细胞内 Ca2+浓度启动细胞凋亡机制 [4]。(5) 濮某和华某通过对有关文献的研究,发现中药及其提取物通过作用于信号转导通路诱导肝癌细胞凋亡、影响肝癌血管生成。其
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