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常用免疫组化试剂介绍.doc

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常用免疫组化试剂介绍.doc
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常用免疫组化试剂介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性:1. 细胞角蛋白/cytokeratin.CK:目前,商品化的细胞角蛋白有 20多种,不同的分子量代表不同类型的上皮标志。通常将 CK分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量)。理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量的 CK;复层上皮多表达高分子量的 CK;移形上皮(膀胱)和假复层上皮(呼吸道的被覆上皮)既表达低分子量的 CK,也表达高分子量的 CK。在癌组织中,低分子量的 CK多在腺癌中表达,高分子量的 CK多在鳞癌中表达。目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种 CK,某些上皮可含 2-10种不同分子量的 CK。因此,目前试图应用单一的 CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。同样,应用 CK来区别腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。因此,CK 的免疫组化结果判断是一个较为复杂的问题,在应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。有必要时,应联合用多种 CK加以综合判断。CK的阳性表达还包括有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。CK的阴性表达有:副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外)。在判断 CK免疫组化结果时应注意几点:(1) CK 的单克隆抗体优于多克隆抗体;(2) CK 常出现斑点状的假阳性反应,应注意识别;(3) 虽然大多数 CK多在胞浆表达,但 CK17多在胞核表达;(4) 绝大多数 CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率和染色强度;(5) 部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见有 CK表达,在诊断时应注意;(6) 淋巴结、扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有 CK8和 18以及 desmin,在判断淋巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。2.上皮膜抗原(epithelial membrane antigen/EMA):EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞和 T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其是分化差的癌 EMA有时可呈强阳性表达。EMA可作为上皮源性肿瘤的常用标记物。EMA 阳性表达的肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。在判断 EMA免疫组化结果时应注意几点:(1) EMA 虽然是上皮细胞非常敏感的标记,但一些非上皮性肿瘤(如浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤)也可阳性表达。因此在癌和其他间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一的参考标记;(2) EMA对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于体表上皮源性肿瘤,因此在腺癌中的表达明显高于鳞癌。3.桥粒蛋白:是上皮细胞特有的结构,是一种广谱的上皮性标记。鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌和间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点:(1) 桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢的颗粒细胞瘤和淋巴结的网织细胞中表达;(2) 甲状腺间变癌阳性表达率低;(3) 冰冻切片效果优于石蜡切片。(二)间叶源性肿瘤的标记1.波形蛋白 Vimentin:是一种 52-58的胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源的肿瘤,是间叶细胞及其肿瘤的特异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤和骨肿瘤 Vimentin是一个关键标记。此外,血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病和恶黑等均可有 Vimentin表达。在判断 Vimentin免疫组化结果时应注意几点:(1) 部分肿瘤(如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等)除 Vimentin(+)表达外,可同时又有 cytokeratin的表达。应结合其组织学形态加以诊断。(2) 福尔马林固定的组织标本,vimentin 假阴性并不少见,冰冻切片酒精固定的组织可提高其敏感性和可靠性;(3) vimentin 不能单独用于软组织肿瘤的诊断,多提倡与其他特异性标记物联合使用。2.结蛋白 desmin:是一种分子量为 50-55ku的细胞浆蛋白,胚胎和成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子宫、皮肤、胃肠道及其他部位的平滑肌多呈(+)表达。现已发现 desmin在良性肿瘤的阳性率和染色强度明显高于恶性肿瘤;高分化的平滑肌肉瘤和染色强度明显高于低分化的平滑肌肉瘤。 Suster 报道 5例皮肤是上皮性平滑肌肉瘤均为(-),而 actin 和 vimentin均为(+)反应。因此目前认为,多应用配套抗体,即与其他肌源性抗体联合应用,不能只根据 desmin (-)来排除平滑肌肉瘤的诊断。在判断 desmin免疫组化结果时应注意几点:(1) 非常原始的肌源性
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