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生化常用抗凝剂.doc

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常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗 凝----应用化学或物理学的方法,抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。一、枸橼酸钠【原理】 枸橼酸钠(柠檬酸钠)是枸橼酸钠的三钠盐。它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物,使 Ca2+失去凝血作用,从而阻止血液凝固。【应用范围】 血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。 【用量】凝血象: 109mmol/L 水溶液,与血液之比为 1:9; 血沉: 106mmol/L 水溶液,与血液之比为 1:4。二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸(EDTA)盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物,从而阻止血凝。【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。不适于凝血象及血小板功能检查。【用量】其有效抗凝浓度为 1~2mg/ml 血液。 血细胞分析仪用EDTA-K2 作抗凝剂,用量为 EDTA-K2•2H2O 1.5~2.2mg/ml血液。 三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合,增强抗凝血酶的作用,灭活丝氨酸蛋白酶,从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。 【用量】 通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成 1g/L 肝素水溶液。取 0.5ml 置小瓶中,37~50℃烘干后,能抗凝 5ml 血液。四、草酸盐草酸盐也是常用的抗凝剂,优点是溶解度大,作用原理是溶解 后解离的草酸根与标本中的 Ca2+形成草酸钙沉淀,使 Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断。血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸(EDTA) EDTA 有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结全成螯合物,从而阻止血液Na2C10H14O8N2+CA2+CAC10H12O8N2+2NA++2H+EDTA 盐经 1000C 烘干,抗凝作用不变,通常配成 15g/L 水溶液,每瓶 0.4ml,干燥后可抗凝 5ml 血液。EDTA 盐对红、白细胞形态影响很小,根据国际血液学标准公委员会(International committee standard of hematology ,ICSH)1993 年文件建议,血细胞计数用 EDTA 二钾作抗凝剂,用量为 EDTA-K2。 2H2O1.5-2.2Mg (4.45±0.85μmol)/ml 血液。EDTA-NA 与 EDTA-K2 对血细胞计数影响均较小,但二钠溶解度明显低于二钾,有时影响抗凝效果,其他抗凝剂不适合于血细胞计数。2.枸椽酸钠(trisodium citrate)枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。2Na3C6H5O7+2CA2+→2CAC6H5O7-+6Na+枸椽酸钠有 2Na3C6H5O7。和 2Na3C6H5。11H2O 等多种晶体。通常用前者配成 109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l 浓度) ,与血液按 1:9 或 1:4 比例使用。枸椽钠对凝血 V 因子有较好的保护作用,使其活性减低缓,故常用于凝血象的检查,也用于红细胞沉降率的测定。因毒性小,是输积压保养中的成分之一。由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的,而抗凝剂主要是作用于积压浆成分,通常所谓的 1:9 比例抗凝的概念是提 1 份体积的抗凝剂作用 9 份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按 1:9的比例加入抗凝剂时,就会发生抗凝剂足或相对过多,这将明显地影响凝象检查结果。为了避免这种现象,有文献报道应根据抗凝剂用量(ml)=0.00185×血量×(100—病人红细胞比积%)这一公式,来计算抗凝剂的用量。3.草酸钠(sodium oxalate)草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。草酸钠通常用 0.1mol/L 浓度,与血液按 1:9 比例使用,过去主要用于凝务象检查。实践发现草酸盐对凝备 V 因子保护功能差,影响凝血酶原时间测定效果;另外由于草酸盐与钙结合形成的是沉淀物,影响自动凝血仪的使用,因此,多数学者认为凝积压象检查选用枸椽酸钠为抗凝剂更为适宜。4.肝素(heparin)肝素广泛存在于肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。它是一种含硫酸基团的粘多糖,是分散物质,平均分子量为 15000(2000-40000) 。肝素可加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶,从而具有阻止凝血酶形成,对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。每毫升血液抗凝需要肝素 15±2.5Iu 。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态,但由于其常可引起白细胞聚集,使用涂片在罗氏染色时产生蓝色背景,因此肝素抗凝血不适全血液学一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。
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