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大豆转基因检测.ppt

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大豆转基因检测.ppt
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大豆转基因检测,,,本实验采用定性pcr方法检测大豆是否为转基因。,实验结果,1.大豆基因组提取质量检测 1.1琼脂糖电泳:图一 吸光值检测:DNA浓度=OD260/OD280=1.85 在1.7-2.0之间,符合PCR的标准。,,PCR结果: 由于第一次结果不是很好,本实验经过两次pcr结果。 第一次:图二,L,C,M,L,C,M,,第二次:图三,实验结果分析,如图一:(1)提取出的大豆基因组成色较好。电泳条带清晰。但颜色较淡,可能是点样的体积过少。(2)跑电泳前使用氯仿/异戊醇擦拭电泳槽面检测DNA的结果较好,,图二:此为第一次跑PCR的电泳图。 图中有明亮且清晰的条带,但Maker跑的质量不是很好。 经分析可能是凝胶的质量不够好,或者是点样点的不好。图三:为第二次PCR产物电泳,效果较好,有清晰明亮条带,能看清。,讨论:,本次实验基本达成实验目的,有些地方需要注意。 (1)提取DNA的时候要仔细,DNA的质量高低影响后续实验。比如蛋白质等物质需要除尽。 (2)使用RNArase需要注意,不然容易导致实验失败。 (3)在配制PCR体系的时候,发现配制母液再分装到各个管时,导致最后一管的体积不够,导致之后影响PCR。 (4)跑电泳前 使用氯仿异戊醇擦拭电泳槽发现结果较好。 (5)本实验使用EB染色,但个人认为可以尝试核酸染料,感觉本次实验染色不如以前使用核酸染料效果佳。,,谢谢,
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