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生化里的概念 定标液的概念.doc

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生化里的概念 定标液的概念定标就是要找出一个参考点,就是一个 K 值(或 F 值) 。它是由仪器与试剂状态确定下来的。当我们测定一个标本时,无论您是用手工的方法或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性。那就要乘上一个 K 值,计算并打印出来的结果对我们就有意义了。K 值就是我们通过定标找出来的。一般上最低要求是由试剂空白与标准品。经过仪器测定出两个吸光度。K=标准浓度/(A 标准-A 试剂空白)标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个 K 值。无论什么样的标本,用其吸光度乘以 K 值我们就得到了答案。因此,K 值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。K 值的决定因素:我们看看 K 值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的) 。第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。吸光度受仪器状况、试剂状况的影响,如果您的仪器相当稳定,试剂是影响 K 值的一个主要因素。如何确定 K 值是正确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说 K 值是准确的,用这个 K 值计算出来病人的结果也是准确的,所以 K 值非常关键。K 值的真面目:K 值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以 K 值的稳定性决定您的仪器与试剂,如果仪器与试剂都十分稳定,那 K 值也很稳定。多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。酶的项目如何确定 K 值:一是计算出来的理论 K 值;K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出 K 值:目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。ε 为摩尔吸光系数定标是前提 质控是保证溯源性标准物质的量值在测量系统中,通过给出的不确定度,即可了解标准物质量值传递的可靠程度。这个可靠程度即标准品的溯源性。为获得测量结果在空间和时间上的可比性,最根本的一点是将所有的独立测量结果都联结到一些共同的、稳定的参考或测量标准上。测量结果可通过与其参考标准建立的联系进行比较。这种把测量结果与参考标准联系起来的策略称为溯源性。《国际通用计量学基本术语》 (VIM)将溯源性定义为:“通 过 一 条 具 有 规 定 不 确 定 度的不间断的比较链,使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准,通常是与国家测量标准或国际测量标准联系起来的特性。 ”注1:此概念常用形容词“可溯源的”来表述。注2:这条不间断的比较链又称为溯源链。根据以上定义,我们可以推衍出以下几点认识:①溯源性是人为赋予测量结果的一种特性,即测量值的特性。因此,严格地讲,可 “溯 源 到 某 一 实 验 室 ”是 “可 溯 源 到 那 个 实 验 室 保 持 的 一 个 参考 值 ”的 简 略 说 法 。 与 之 类 似 ,“可 溯 源 到 国 际 单 位”是 “可 溯 源 到 公 认的 复 现 国 际 单 位 的 参 考 值”的 简 略 说 法 。 其目的是保证测量结果的有效、可靠;换言之,就是有效、可靠的测量结果须具有溯源性;②每个可溯源的测量结果应附有合理评定的不确定度。没有不确定度的测量结果是不完整的;③要 实 现 量 值 的 溯 源 , 必须具备可以与测量结果相联系的系列参考标准,通常是国家标准(标准物质) 或国际标准,这些测量标准构成了国家的测量基标准体系;④要使测量结果能够与参考标准联系起来,应具有适当的比较方式作为基本比较链节 , 构 成 的 比 较 链 ( 溯 源 链 )。⑤比较链须是不间断的,没有溯源到国家测量标准的测量不应是可溯源的。溯 源 是 一 种 自 下 而 上 的 自 愿 行 为 , 可 通 过 校 准 、 比 对 、 能 力验 证 等 形 式 实 现 。 当 一 个测量结果的溯源性得到确认时,它就是准确可靠的。
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