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真菌检测的临床意义.ppt

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真菌检测的临床意义.ppt
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真菌检测的临床意义,真菌感染的分类,根据真菌侵犯人体的部位分为四类: 浅表真菌病 皮肤真菌病 皮下组织真菌病 系统性真菌病,,,,,浅部真菌病,深部真菌病,深部真菌感染,深部真菌感染是一种重症感染,死亡率为40-90% 真菌病的发病率呈上升趋势,尤其对重症监护病房和免疫缺陷患者、以及癌症患者,8%的院内感染由真菌引起 白色假丝酵母、热带假丝酵母、光滑假丝酵母、隐球菌等是最常见的感染病原菌 真菌感染的早期诊断、尽早开始治疗,是挽救患者生命的最重要的手段,Company Logo,4,近年深部真菌变迁的特点,念珠菌血症:白色念珠菌为主呈下降趋势非白念:光滑念珠菌,近平滑念珠菌和热带念珠菌,克柔念珠菌呈上升趋势隐球菌、曲菌的比例上升。死亡率增加不同科室的病人发生感染的真菌不同,同一个体内可能发生两种或两种以上的真菌感染产生对氟康唑、两性霉素B的耐药菌株,并有增加的趋势,,近年来,非白色念珠菌的分离率有所上升,全球ARTEMIS Disk研究结果显示: 1997-2003年非白色念珠菌分离率有所升高,分离率(%),MA Pfaller, et al. J Clin Microbiology. 2005:5848-5859.,侵袭性肺真菌感染的流行病学 2005年南京军区总医院30例:曲霉31%,白念24%,光滑念17%,热带念13%,新生隐球菌、克柔念及近平滑念各3% 2002~2006年北京协和医院152例肺真菌感染中确诊38例:曲霉39.5%,隐球菌34.2% 、毛霉10.5%,念珠菌仅5.3% 总之,目前仍以念珠菌感染为主,但发病呈下降趋势,白念减少,克柔念和光滑念增多;曲霉比例逐年增高,可能成为主要病原菌 存在争议,主要因诊断标准不同,国外以组织病理学或组织培养为确诊依据,我国以痰或BALF培养为依据,住院时间长高敏感性 糖尿病 肾衰竭 血液透析急性胰腺炎广谱抗生素的使用中心静脉导管癌症和化疗肠外营养外科手术移植服用免疫抑制剂多处念珠菌定植,ICU中发生侵袭性念珠菌病的危险因素,Luis Ostrosky-ZeichnerCrit Care Med 2006; 34:857–863,ICU患者念珠菌血症的高危因素,一项10年(1990-2000)的回顾性荟萃分析,患者比例(%),Charles PE et al. Intensive Care Med. 2003;29:2162-2169.,临床常见的条件性真菌感染,念珠菌病: 最常见,血源感染的第4位。 曲霉菌病: 常见于干细胞移植、实体器官移植、大剂量化疗患者和免疫缺陷患者。 隐球菌病: 艾滋病人患病率为10-20%。 接合菌病(毛霉病):多见于重症糖尿病、烧伤病及器官移植病人。,临床有增多趋势的条件性真菌,非白念念珠菌感染 毛孢子菌感染 地霉感染 镰刀菌感染 枝顶孢霉感染 暗色真菌感染 马尔尼菲青霉:目前已成为HIV阳性患者的主要条件致病菌,Company Logo,真菌感染的实验室鉴定方法,形态学检查培养+鉴定血清学检查分子生物学检查其它:组织病理学,影像学,真菌直接涂片的诊断价值,诊断阳性率高 BALF培养阳性率40%,涂片64%,涂片+培养67%(Ann Intern Med 1997, 29: 535; Respir Med 1992, 86:243) 快速:2-4h可以报告结果:直接镜检,G染色,墨汁染色 有助于鉴别感染类型 是真菌丝还是假菌丝 有隔菌丝:曲霉菌属 唑类抗真菌药(伊曲康唑、伏立康唑)有效 无隔菌丝: 根毛霉属、根霉属、毛霉属、犁头霉属、小克银汉霉属 两性霉素B敏感,,The lancet, 2003, 3: 230-240,马xx,右下支气管黄曲霉,支气管液,Mucor species - Microscopic Morphology, 400x Lactophenol cotton blue 大型孢子囊,无囊托,无匍 菌丝及假根,真菌培养,结果可靠 可进行分类鉴定到种,可进行药敏试验 无菌部位分离出任何菌株,在未得到可靠证据证明其污染时,不应确诊为污染。 有菌部位来源标本经两次或以上培养为同一结果时,可初步判断为感染菌。,真菌的血清学检测,真菌细胞壁的成分1,3- β- D葡聚糖(G试验):应用范围:曲霉菌、念珠菌、镰刀霉、 毛孢子菌、 (隐球菌、毛霉菌除外) 真菌抗原 半乳甘露聚糖抗原(GM试验)甘露聚糖抗原新型隐球菌的荚膜多糖抗原 真菌特异性代谢产物D-阿拉伯糖醇,真菌血清学检测方法优缺点,优点: 报告结果快速 敏感性高 取样方便 定量检测可判断感染严重程度及疗效评估 缺点:特异性不高,真菌的分子生物学检测方法,PCR方法:一步法PCR、巢式PCR菌种:念珠菌、隐球菌、曲霉菌,重要医学酵母菌分类,医学重要的霉菌分类,1. 监测真菌
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