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猫杯状病毒抗体(FCV Ab)ELISA检测试剂盒 中英文说明书.doc

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猫杯状病毒抗体(FCV Ab)ELISA检测试剂盒 中英文说明书.doc
资源描述:
上海谷研实业有限公司联系人:高先生 移动电话: 18321818584电 话: 021-39921927 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断猫杯状病毒抗体(FCV Ab)ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA) 。往预先包被猫杯状病毒抗体(FCV Ab)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的猫杯状病毒抗体(FCV Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,判断样品是否含有猫杯状病毒抗体(FCV Ab) 。样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心 10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30分钟取上清。3. 细胞上清液:3000 转离心 10分钟去除颗粒和聚合物。4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10分钟取上清。5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项1. 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 预处理后的样本无需稀释,直接取 10μL 加样即可。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置 备注微孔酶标板 96孔 48孔 无阴性对照 0.3mL 0.3mL 无阳性对照 0.3mL 0.3mL 无样本稀释液 6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物 A 6mL 3mL 无底物 B 6mL 3mL 无终止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张 无说明书 1份 1份 无自封袋 1个 1个 无试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1份的 20×洗涤缓冲液加 19份的蒸馏水。洗板方法1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5次。2. 自动洗板机:每孔注入洗液 350μL,浸泡 1min,洗板 5次。操作步骤1. 从室温平衡 20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔,阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL;3. 待测样本孔先加待测样本 10μL,再加样本稀释液 40μL;4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5次(也可用洗板机洗板) 。6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。7. 每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm波长处测定各孔的 OD值。3. 阴性判断:样品 OD值<临界值(Cut off) ,样品为阴性4. 阳性判断:样品 OD值>临界值(Cut off) ,样品为阳性试剂盒性能1. 准确性:阳性对照孔 OD值平均值≥1.00;阴性对照孔 OD值平均值≤0.15,说明试验结果有效。2. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。4. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。5. 有效期:6 个月免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Cat Feline Calicivirus Antibody (FCV Ab) ELISA Kit instructionIntended useThis FCV Ab ELISA kit is intended Labora
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